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小鼠体内培养
体外培养
2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体
学习目标:⑴ 掌握动物细胞融合与植物体细胞杂交的区别和联系。
⑵ 简述动物细胞融合和单克隆抗体制备的过程
(3)了解单克隆抗体在医学实践中的应用,并说其应用实例
学习重难点:动物细胞融合技术与单克隆抗体的制备
学习过程
一、自主学习
(一)、动物细胞融合
(1)概念:指在一定条件下将 或 动物细胞结合形成一个细胞的过程。
(2)过程: 不同类型的动物细胞 细胞。
(3)原理:
(4)诱导动物细胞融合的方法有三种:生物方法( )、化学方法( )、
物理方法( )。
比较动物细胞融合与植物体细胞杂交的异同
比较项目 细胞融合的
原理 诱导手段 用途
植物体细
胞杂交
细胞膜的流
动性
离心、电刺激、振动、
聚乙二醇(PEG)诱导
克服远源杂交不亲
和,获得杂种植株
动物细胞
融合 制备单克隆抗体
例 1、动物细胞融合的目的中最重要的是 ( )
A.克服远源杂交不亲和 B.制备单克隆抗体
C.培育新物种 D.生产杂种细胞
例 2、能使动物细胞融合的特有的诱导因子是 ( )
A.离心 B.灭活的病毒 C.电刺激 D.振动
(二) 单克隆抗体
1 回忆(1).想一想:什么是克隆?
(2).抗体:是由淋巴细胞(浆细胞)产生的,化学本质为 ,具有特异性。
(3).传统抗体的产生方法及缺陷是什么?
4.怎样大量生产单克隆抗体?
提示:仅用细胞培养培养 B 淋巴细胞可以吗?
提示: 我们学的哪种细胞可以无限增殖?
提示:有什么方法能使 B 细胞产生抗体的能力和肿瘤细胞无限增殖能力同时具备
呢?根据以上知识勇敢说出你的大量生产单克隆抗体的思路是什么?
2、单克隆抗体的制备
(1)过程
【合作探究】1.制备单克隆抗体的过程有两次筛选,两次筛选的目的是什么?
第一次筛选是
第二次筛选是
2.杂交瘤细胞的特点:既能大量 ,又能产生 。
3.单克隆抗体的优点: 强、 高,并可能 。
(三)单克隆抗体的应用
1.作为诊断试剂:准确识别各种 物质的细微差异,并跟一定抗原发生 地
结合,有 、 、 、 的优点。
2.用于治疗疾病和运载药物:
①主要用于 治疗,把 细胞的单克隆抗体跟放射性同位素、化学药
物或细胞毒素相结合,制成“ ”,注入体内,借助单克隆抗体的导向作用,能将
药物定向带到癌细胞所在位置,在原位杀死癌细胞。
② 优点:疗效高,毒副作用小。
灭活的病毒
PEG
给小鼠注射特
定的抗原蛋白
培养骨髓瘤细胞
→ 从________中分
离 B 淋巴细胞
→骨髓瘤细胞
选择培养基 克隆检测
→ __________
2
例 3、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合,得到杂交细胞,经培养可产生大量的单克隆抗体,
与骨髓瘤细胞融合的是 ( )
A.经过免疫的 B 淋巴细胞 B.不经过免疫的 T 淋巴细胞
C.经过免疫的 T 淋巴细胞 D.不经过免疫的 B 淋巴细胞
【课堂巩固】
1、动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中,正确的是 ( )
①诱导融合的方法完全相同 ②所用的技术手段不相同 ③所采用的原理完全相同
④都能形成杂种细胞
A.①② B.①③ C.②④ D.③④
2、单克隆抗体是指( )
A.单个骨髓瘤细胞增殖产生的抗体
B.单个淋巴细胞增殖产生的抗体
C.单个杂交瘤细胞增殖产生的高度单一的抗体
D.单个抗体通过克隆,产生大量抗体你
3、用动物细胞工程技术获取单克隆抗体,下列实验步骤中错误的是 ( )
A.将抗原注入小鼠体内,获得能产生抗体的 B 淋巴细胞
B.用纤维素酶处理 B 淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞
C.用聚乙二醇作诱导剂,促使能产生抗体的 B 淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合
D.筛选杂交瘤细胞,并从中选出能产生所需抗体的细胞群,培养后提取单克隆抗体
4、下图是单克隆抗体制备过程示意图,其中 1 过程注射的物质和 A 细胞的名称为 ( )
A、抗体、T 淋巴细胞
B、抗原、T 淋巴细胞
C、抗体、B 淋巴细胞
D、抗原、效应 B 淋巴细胞
【课后练习】
5、右图是某种淋巴细胞,膜外颗粒状物质为抗体。据图回答:
(1)这是 细胞,它是由
分化而来的。
(2)抗体从开始合成到分泌出细胞,经过的细胞结构顺序是(填标号) 。抗体的
分泌说明细胞的各种生物膜在结构上具有 ,并以〔 〕 的形式转变。
(3)在分泌抗体时要消耗由〔 〕 提供的能量。
(4)抗体的化学本质是 ,它能与 发生特异性结合,发挥免疫效应,该过程属
于 免疫。
(5)若该抗体是单克隆抗体,则该细胞名称为 。在制备单克隆抗体的过程中,要
应用的动物细胞工程的技术手段是 。
6、右图为细胞融合的简略过程,请据图回答:
(1)若 A、B 是植物细胞,在细胞融合之前已用____ __________
____________处理,除去了____________;由 A、B 到细胞 C
的过程中,常用的物理方法是_____________________________。
融合完成的标志是_______________。
(2)若 A、B 是植物细胞,则形成的 D 细胞还要应用__________
____________________技术把 D 培养成植株。
(3)若 A、B 是动物细胞,一般取自________________________________,
然后用 使其分散开来;由 A、B 到 C 的过程中,常用的不同于植物细胞融合的手段
是 ,所形成的 D 称为 ,A、B 融合为 C 的过程说明了细胞膜具
有 。
(4)若该过程是制备单克隆抗体,A 为小鼠效应 B 细胞,那么,在获得此细胞之前,小鼠已经被
注 射 了 。 注 射 后 小 鼠 身 体 发 生 了 相 应 的 免 疫 反 应 , 生 成 了
__________________________________________,图中 B 为 。
(5)若该过程仍是制备单克隆抗体,在 A、B 到 C 的过程中,所形成的 C 有_____种,用来培养的
D 细胞应该是_________________。从中选择出它的方法是_________________培养,获得 D 后,常
用的培养方法是培养液中培养和________________________________。