微生物的培养与应用
一、选择题
1.下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述,其中错误的是
A.用蒸馏水配制牛肉膏蛋白膝培养基,经高温、高压灭菌后倒平板 B . 取
104、105、106 倍的土壤稀释液和无菌水各 0.1ml,分别涂布于各组平板上 C.将实验
组和对照组平板倒置,370C 恒温培养 24-48 小时 D.确定对照组无菌后,选择菌落
数在 300 以上的实验组平板进行计数
2.下列有关分解尿素的细菌,说法正确的是( )
A.尿素固体培养基的平板中只有少量肉眼可见的菌体
B.筛选分解尿素的细菌时,培养基中唯一的营养物质是尿素
C.加有酚红的尿素培养基,兼有选择与鉴别目标菌种的功能
D.脲酶需要经过内质网和高尔基体的加工后才具有生物学活性
3.尿素是一种重要的农业肥料,但若不经细菌的分解,就不能更好地被植物利用。下
列有关土壤中尿素分解菌的分离和培养的叙述,正确的是( )
A.培养基中加入尿素作为唯一碳源,该培养基是鉴别培养基
B.测定土壤中分解尿素的细菌数量和测定土壤中其他细菌的数量可采用相同的稀释度
C.细菌合成的脲酶能将尿素分解成氨,氨会使培养基的碱性增强,pH 升高
D.利用稀释涂布平板法可以直接完成土壤中分解尿素的细菌的分离计数和纯化鉴定
4.制备鉴别分解纤维素的微生物的培养基,除了必需营养成分外,还需要添加( )
A.酚红 B.醋酸洋红 C.伊红美蓝 D.刚果红
5.下列是关于“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验操作的叙述,其中错误的是
( )
A.利用稀释涂布平板法准确估计菌落数目的关键是恰当的稀释度
B.若要判断选择培养基是否起到了选择作用需要设置未接种的牛肉膏蛋白胨培养基作
为对照
C.在土壤中分解尿素的细菌的分离和计数实验中,应采用稀释涂布平板法
D.以尿素为唯一氮源且添加了酸碱缓冲剂的培养基来培养该细菌后不会使酚红指示变
红
6.乙醇等“绿色能源”的开发备受世界关注。下图是利用玉米秸秆生产燃料酒精的大致
流程。有关叙述错误的是( )
A.从反刍动物瘤胃中生存的某些微生物中可以提取到水解玉米秸秆需要的酶
B.玉米秸秆预处理后,应该选用淀粉酶进行水解,使之转化为发酵所需的葡萄糖
C.从生物体提取出的酶首先要检测酶的活性以便更好地将酶用于生产
D.发酵阶段需要的菌种是酵母菌,生产酒精时要控制无氧的必要条件
7.取 9 个洁净培养皿,均分为三组(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ),各组分别加入等量的不同培养
基,每个平板均接种 0.1mL 相同稀释度的大肠杆菌菌液,37℃培养 24 小时后,统计菌
落数(见下表),下列相关叙述错误的是( )
组别 培养基
各平板的菌落数
1 2 3
Ⅰ 琼脂、C6H12O6、NH4NO3 30 31 27
Ⅱ
琼脂、C6H12O6 、NH4NO3 、维生
素 169 178 193
Ⅲ 琼脂、NH4NO3、维生素 0 0 1
A.Ⅰ组和Ⅱ组说明维生素可以促进大肠杆菌生长繁殖
B.Ⅱ组和Ⅲ组说明大肠杆菌的正常生长需要葡萄糖
C.三组实验所使用的培养基均需 100℃、30min 灭菌
D.三组实验均采用稀释涂布平板法,以便菌落计数
8.下列关于微生物实验操作的叙述,正确的是( )
①培养微生物的试剂和器具都要进行灭菌
②接种前后,接种环都要在酒精灯火焰上进行灼烧
③倒平板时,倒入的培养基冷却后盖上培养皿的皿盖
④平板划线操作中,随着划线次数的不断增加其接种环上的菌种会越来越少
⑤高压灭菌加热结束时,打开放气阀使压力表指针回到零后,开启锅盖
⑥为了防止污染,接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落、接种后的培养皿要倒置
⑦使用过的培养基应进行高压蒸汽灭菌处理后再丢弃
⑧配培养基、倒平板、接种需要在酒精灯火焰旁进行
A.①②④⑦ B.①③⑤⑧ C.②④⑥⑧ D.③④⑥⑦
9.可以作为硝化细菌碳源、氮源及能量来源的物质依次是( )
A.含碳有机物、氨、光 B.含碳无机物、氮、氮
C.含碳有机物、氨、氨 D.含碳无机物、氨、氨
10.在缺乏氮源的培养基上,大部分微生物无法生长;在培养基中加入青霉素,可以
抑制细菌和放线菌;在培养基中加入 10%的酚,可以抑制细菌和霉菌.利用上述方法
不能从混杂的微生物群体中分别分离出( )
A.大肠杆菌 B .霉菌
C.放线菌 D.圆褐固氮菌
11.关于灭菌和消毒的说法中,不正确...的是( )
A.灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物
B.消毒是指使用温和的理化因素杀死物体内外所有的微生物
C.用酒精擦拭双手、用氯气处理饮用水源等操作属于消毒
D.常用灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌等
12.下列关于物品进行消毒或灭菌方法的选择,错误的是( )
A.接种环——酒精消毒 B.培养基——高压蒸汽灭菌
C.牛奶——巴氏消毒 D.玻璃器皿——干热灭菌
13.平板划线法和稀释涂布平板法是最常用的两种微生物接种方法。其他条件相同且
适宜时,使用这两种接种方法接种同种微生物。下列有关叙述正确的是( )
A.使用成分相同的液体培养基
B.对接种工具的灭菌操作相同
C.都能进行菌种的纯化和计数
D.得到的菌落的特征不相同
14.下列关于无菌技术应用的叙述,正确的是( )
A.煮沸消毒可杀死物体内外所有微生物
B.使用后的培养基可以直接丢弃
C.紫外线只适用于表面灭菌和空气灭菌
D.金属器具只能采用灼烧灭菌法
二、解答题
15.尿素作为主要的化肥种类之一,也是一种重要的化工原料。目前处理含尿素废水的
方法有 3 种 :化学热力学水解法、微生物水解法及脲酶水解法。某研究小组欲从土壤中
筛选能高效分解尿素的细菌(目标菌)。回答下列问题。
(1)给农作物施用尿素,主要是为了给植物提供 元素,过量施用随水土流失后易造成
水体污染,这种现象叫水体富营养化。为了筛选能分解尿素的细菌,在配制培养基时需要
添加 KH2PO4 和 Na2HPO4,其作用有
(答出两点即可)。
(2)要从土壤中分离目标菌,关键的实验思路是 。理由
是
。
(3)为对分离得到的菌种做进一步的鉴定,常在固体培养基中加入酚红试剂,若菌落周围出
现 ,可以初步鉴定该种细菌为目标菌,其原理是 。
(4)运用固定化脲酶技术处理含尿素废水时应采用 法对脲酶进行固定
化,理由是
。
16.土壤中的苯酚(C6H5OH)对环境有极大的污染,实验室希望能从土壤中分离出能专
一性降解苯酚的微生物,下图是部分实验过程。回答下列问题:
(1)为了分离纯化目的菌种,①~④步骤的培养基中都加入了一定浓度的苯酚,该物质
能为微生物提供________,除此之外,培养基中一般都还需要水、______________等
营养物质。
(2) 制 备 步 骤 ④ 所 需 要 的 固 体 培 养 基 , 操 作 顺 序 是 : 计 算 → 称 量
→________→________→倒平板。为了在步骤⑤的平板上形成单个的菌落,涂布平板
前 , 需 要 对 培 养 液 进 行 多 次 稀 释 , 原 因 是
______________________________________________。
(3)研究人员想通过比较试管甲和乙中微生物的生长情况,来证明分离出来的微生物只
能以苯酚作为碳源,若甲试管中的液体培养基中的唯一碳源是苯酚,那么,乙试管中
培养基成分与甲相比,区别是______________________。研究人员对甲、乙两只试管
进行接种时,所选菌种都来自步骤⑤平板上的同一个单菌落,这样做的目的是
__________________________。
参考答案
一、选择题
题
号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14
答
案 D C C D B B C A D A B A B C
二、解答题
15.(1)氮 为细菌生长提供无机营养,作为缓冲剂维持细胞生长过程中 pH 的相对稳定
(2)用尿素为唯一氮源的培养基选择培养 不能合成脲酶的微生物无法分解尿素获取氮
源,生长受到抑制
(3)红色环 目标菌产生的脲酶催化尿素分解生成氨,使 pH 上升,酚红试剂在碱性条件下
会由无色变红,出现红色环
(4)化学结合(或物理吸附) 酶分子很小,容易被吸附或结合
16.(1)碳源 氮源和无机盐
(2)溶化 灭菌 在稀释度足够高的菌液里,聚集在一起的微生物易于分散成单个细胞
(3)用其他碳源替代苯酚 保证甲、乙两支试管中的微生物种类是相同的