1．请回答下列有关酿酒的问题：
（1）酿酒过程中需要用到酵母菌，其异化作用类型是____，其细胞内将葡萄糖分解为酒精的酶存在于_____。
（2）某同学尝试用新鲜葡萄制作葡萄酒，发酵过程拧松瓶盖的目的是__________________。发酵后期拧松瓶盖的间隔时间可延长，原因是_____________________________________。
（3）过去啤酒生产都以大麦芽为原料，借用大麦发芽后产生的淀粉酶，使淀粉分解。现在我们将___________应用于啤酒生产中，可以在种子不发芽的情况下诱导淀粉酶的合成。这样做的好处是_____________________________________________________。
（4）为研究发酵罐中酿酒酵母菌的生长情况，常要取样统计分析，并测定pH值。若某研究人员将样品的次序搞乱了，那么判断取样顺序的主要依据是_____________________（填“酵母菌的数量”或“发酵液的pH”）。
【答案】 （1） 兼性厌氧型 细胞质基质 （2）释放二氧化碳 发酵后期，瓶内的有机物减少，酒精发酵产生的二氧化碳减少 （3）赤霉素 避免大麦因发芽而消耗大量养分 （4）发酵液的pH
2．（1）乙醇等“绿色能源”的开发备受世界关注。利用玉米秸杆生产燃料酒精的大致流程为：
①玉米秸杆经预处理后，应该选用______酶进行水解，使之转化为发酵所需的葡萄糖。
②从以下哪些生物中可以提取上述酶（多选）（_______）
A. 酿制果醋的醋酸菌 B. 生长在腐木上的霉菌
C. 制作酸奶的乳酸菌 D. 生产味精的谷氨酸棒状杆菌
E. 反刍动物瘤胃中生存的某些生物
③若从土壤中分离产生这种酶的微生物，所需要的培养基为________（按功能分），培养基中的碳源为________。
④发酵阶段需要的菌种是________，在产生酒精时要控制的必要条件是________。
（2）草莓生产上传统的繁殖方式易将所感染病毒传播给后代，导致产量降低、品质变差。运用微型繁殖技术可以培育出无病毒幼苗。草莓微型繁殖的基本过程如下：
请回答：
①微型繁殖培育无病毒草莓苗时，一般选取________作为外植体，其依据是________。
②在过程Ⅰ中，常用的MS培养基主要成分包括大量元素、微量元素和________，在配制好的培养基中，常常需要添加________，有利于外植体启动细胞分裂形成愈伤组织，接种后2--5d，若发现外植体边缘局部污染，原因可能是_____________。
【答案】(1) 纤维素 B E 选择培养基 纤维素 酵母菌 无氧 (2) 茎尖 茎尖病毒极少，甚至无病毒 有机物 植物激素 外植体消毒不彻底
③若从土壤中分离产生纤维素酶的微生物，需要用以纤维素为唯一碳源的选择培养基来培养微生物。在该培养基中，只有纤维素分解菌能正常生长，而其他微生物则不能正常生长。
④发酵阶段是利用酵母菌进行无氧呼吸产生酒精的原理，所以需要的菌种是酵母菌，在产生酒精时要控制的必要条件是无氧。
(2) ①由于茎尖病毒极少，甚至无病毒，所以在微型繁殖培育无病毒草莓苗时，一般选取茎尖作为外植体。
②在过程Ⅰ（脱分化形成愈伤组织的过程）中，常用的MS培养基的主要成分包括大量元素、微量元素和有机物。由于不同植物激素的比例会影响植物细胞发育方向，因此在配制好的培养基中，常常需要添加植物激素。外植体边缘局部污染，说明外植体消毒不彻底。
3．[生物——选修1:生物技术实践]
下图是利用固定化酵母发酵生产樱桃果酒的工艺流程，请分析回答：
（1）该流程中清洗的目的是___________，为了提高樱桃的出汁率，在压榨前可加入一定量的________酶处理1小时。发酵前需要在樱桃汁中添加适量白砂糖，主要目的是___________。
（2）控制发酵温度，经过10〜12天后，样液中是否产生酒精，可以用____来检验。主发酵结束后，需将上层酒液转移到另一灭菌容器中进行后发酵，为了防止醋酸菌污染，加入容器中液体的量应_______（填“注满”“2/3”或填“1/3”），以保证果酒品质。
（3）固定酵母细胞的方法常用_____法，常用的原料是海藻酸钠溶液，海藻酸钠是一种多孔性载体，在一定浓度范围内选择较低的海藻酸钠的浓度进行固定化酵母，产生酒精量较高，其主要原因是______。利用接种固定化酵母酿酒，是利用了固定化酵母具有___________的特点。
（4）采用平板划线法我们分离纯化得到了优良酵母菌品种，可以釆用___________的方法，对菌种长期保存。
【答案】 （1）洗去浮尘 果胶 提高酒精的生成量 （2）(酸性)重铬酸钾溶液 注满 （3）包埋 凝胶珠的相对渗透性较强, 利于底物的进入和产物的排出 可反复利用 （4） 甘油管藏
用。
（2）检验酒精常用酸性重铬酸钾溶液，若变成灰绿色，则说明有酒精生成。醋酸菌为好氧微生物，在氧气充足的条件下可将酒精氧化为醋酸，影响果酒品质。因此应该将酒液注满容器，降低氧气含量，抑制醋酸菌的生长。
（3）固定酵母细胞的方法常用包埋法。在一定浓度范围内选择较低的海藻酸钠的浓度进行固定化酵母，产生酒精量较高，其主要原因是凝胶珠的相对渗透性较强, 利于底物的进入和产物的排出。正因为固定化细胞能够增殖，所以可以重复使用。（4）对得到的优良酵母菌品种，可以釆用甘油管藏的方法，对菌种长期保存。
4．稻瘟病是水稻最重要的病害之一，为达到防治目的，科研人员通过转基因技术培育出了抗稻瘟病水稻新品种。请回答下列问题：
（1）DNA粗提取实验中，可使溶解在氯化钠溶液中的DNA析出的方法有__________、__________。
（2）构建基因表达载体时，通常用不同种限制酶切割目的基因形成两个不同的黏性末端，其目的是_______。
（3）通过RT-PCR技术以抗稻瘟病基因的RNA为模板扩增出cDNA。在PCR过程中，两个引物是__________酶的结合位点；用cDNA单链与该抗性水稻植株的单链DNA进行分子杂交，可能出现游离的单链区，其原因是____________________。
（4）如果一个抗性基因整合到非抗性水稻的一条染色体上，得到的二倍体转基因抗性植株自交，子代中抗性与非抗性植株的数量比为_________________。
（5）关于转基因生物安全性问题的争论，主要表现在三个方面：______________________________。
【答案】 （1）加蒸馏水使盐溶液稀释到0.14mol/L 加95%冷酒精溶液后静置 （2） 防止酶切产物自身环化（连接） （3）热稳定DNA聚合酶 DNA分子含有内含子、非编码区等序列，mRNA分子中没有相应互补的碱基序列；（cDNA链和单链DNA存在没有互补配对的序列，仍然为两条游离的单链），所以出 现游离的单链区（4） 3：1 （5） 食物安全、生物安全和环境安全
单链DNA进行分子杂交（碱基配对），只有部分区域形成杂交区，部分不能配对的碱基则出现游离的单链区。
（4）如果一个抗性基因（假设为A）整合到非抗性水稻的一条染色体上，得到的二倍体转基因抗性植株（基因型设定为AO）自交，其产生的配子有两种（A:O=1:1），所以雌雄配子受精发育成的子代中，抗性（A_）与非抗性植株（OO）的数量比为3:1。
（5）转基因生物的安全性争论主要表现在三个方面，即食物安全、生物安全和环境安全。
5．白色污染属于全球性的环境问题，为了治理白色污染，我国科学院研究团队首次发现了能够高效降解聚氨酯（PU）塑料的新菌种，并把该菌种命名为塔宾曲霉菌，在塔宾曲霉菌的作用下，两周就可见塑料生物降解过程，两个月后其培养基上的塑料聚合物基本消失。这项成果为土壤污染处理和生态修复提供了新的线索，也为处理塑料垃圾开辟了新途径。请回答下列问题：
（1）在进行微生物的培养时需要用到培养基，若要对该菌种进行扩大培养，需要使用___________培养基；若要分离、纯化该菌种，需要使用___________培养基；若要筛选该菌种，则需要使用以__________为唯一碳源的选择培养基。
（2）若要测定样品溶液中该菌种的数目，可将100mL含该菌种的样品溶液稀释104倍后，取0.1 mL稀释液均匀涂布在选择培养基表面，测得菌落数的平均值为240个，且空白对照组平板上未出现菌落，则100mL原菌液中含有塔宾曲霉菌______个。与血细胞计数板计数法相比，试分析该方法的优缺点_____（优缺点各答一个）。
（3）请你结合该菌株的特性对处理塑料垃圾给出一条合理建议___________。
【答案】 （1） 液体 固体 聚氨酯（PU）塑料 （2） 2.4×109 优点：能够只计数活菌数目；缺点:统计的活菌数目往往比实际数目低 在垃圾填埋场喷洒塔宾曲酶菌菌液
数目往往比实际数目低。
（3）结合该菌株的特性对处理塑料垃圾的建议：由于塔宾曲霉菌能够降解塑料，因此可以在垃圾填埋场喷洒塔宾曲霉菌菌液，以便于其能降解塑料，减少白色污染。
6．（生物——选修1：生物技术实验）
植物体内含有多种有效成分，不同的有效成分提取的方法不同。请根据所学知识,回答下列问题。
（1）玫瑰精油是制作高级香水的主要原料，由于它具有_______________________________的性质，所以一般用水中蒸馏法来提取，在得到的油水混合物中加入________可以促进油和水分层。
（2）橘皮精油的主要成分是___________，通常用压榨法来提取，为了解决直接压榨出油率低的问题，压榨前的处理措施是________________，另外为了促进压榨后的油水分层，在压榨时还要加入________，并把pH调节到7-8。
（3）经常食用胡萝卜可预防夜盲症和干皮症，原因是一分子β-胡萝卜素在体内可氧化成两分子_________。现代工业可用微生物发酵来生产胡萝卜素，就是把控制β-胡萝卜素_____________（填：“合成的酶”或者“合成酶的基因”）导入酵母菌，随后培养该种酵母菌，从培养液中来提取β-胡萝卜素，提取的胡萝卜素粗品可通过_____法进行鉴定。
【答案】（1） 化学性质稳定，难溶于水，易溶于有机溶剂，能随水蒸气一同蒸馏 氯化钠（2） 柠檬烯 干燥去水并用石灰水浸泡 碳酸氢钠和硫酸钠（3） 维生素A 合成酶的基因 纸层析法
7．真核生物基因中通常含有内含子，而原核生物基因中没有，原核生物没有真核生物所具有的切除内含子对应的RNA序列的机制。下图表示基因文库的制备和从基因文库中提取胰岛素基因的过程。回答下列问题：
（1）从基因结构分析，与基因组文库中的基因相比，从cDNA文库中获得的目的基因缺少的结构有______（至少写两个）等。图中①过程中存在的碱基配对方式有___________（模板上的碱基在前）；②过程所用的工具酶有_____________________。
（2）为了便于导入基因，细菌培养基中一般加入___________，理由是___________。
（3）依据图中杂交结果，应选取培养基上___________（填字母）菌落继续培养，才能获得还有胰岛素基因的受体菌。
（4）从大肠杆菌中获得的“胰岛素”未能达到期待的生物活性，从细胞结构角度分析，其原因是_______。
【答案】 （1） 启动子、终止子、内含子 A-T、U-A、G-C、C-G 限制酶，DNA连接酶 CaCl2
（或钙离子) 钙离子使细菌处于感受态（或钙离子能提高细菌从外界吸收DNA的能力） b 大肠杆菌中缺少对胰岛素进行加工和修饰的内质网和高尔基体
（3）依据前面的分析可知，应选取培养基上b菌落继续培养，才能获得含有胰岛素基因的受体菌。
（4）从细胞结构角度分析，由于大肠杆菌是原核生物，细胞内缺少对胰岛素进行加工和修饰的内质网和高尔基体，所以从大肠杆菌中获得的“胰岛素”没有期待的生物活性。
8．[生物一选修3:现代生物科技专题]
青蒿素是最有效的抗疟药之一，但野生黄花蒿青蒿素产量低。研究人员利用基因工程技术培育出高产的转基因黄蒿。请回答下列问题：
（1）建立cDNA文库是获取基因的途径之一。与基因组文库相比，cDNA文库中的基因数目_________。
（2）青蒿素合成途径存在两种关键酶——紫穗槐二烯合酶（ADS)和青蒿酸合成酶(CYP71AV1)。研究人员从黄花蒿的cDNA文库中获取了两种关键酶的基因。在对它们进行PCR扩增时，向反应体系中加入的物质中，除了模板不同，___________也肯定不同。
（3）若要使目的基因在受体细胞中表达，需要通过质粒载体而不能直接将目的基因导入受体细胞，原因有______________、____________。检测这些酶基因是否转录采用_______技术。利用蛋白质工程获得活性更高的酶时，需根据所设计蛋白质的结构推测其____________序列，最终确定相对应的脱氧核苷酸序列并经____________获得所需的基因。
（4）有人另辟蹊径，成功培育出能生产青蒿素的转基因酵母菌。利用转基因酵母菌生产青蒿素的优势有_________________。
【答案】 （1） 少 （2）引物(对） （3）目的基因无复制原点 目的基因无表达所需启动子(其他合理答案也可） 分子杂交 氨基酸 基因修饰 （4） 繁殖快，易培养，成本低，可以工业化生产，生产不受季节、气候、地域限制
（3）将目的基因导入受体细胞中稳定遗传且能正确表达，需要通过质粒载体而不能直接将目的基因导入受体细胞，原因有单纯的目的基因没有复制原点，不能在受体细胞内复制遗传，同时也没有启动子和终止子，使目的基因无法正确地表达。检测目的基因是否转录通常采用分子杂交技术。利用蛋白质工程获得活性更高的酶时，需根据所设计蛋白质的结构推测其氨基酸序列，最终确定相对应的脱氧核苷酸序列并经基因修饰获得所需的基因。
（4）酵母菌繁殖快，容易培养，且成本较低，可工业化大量生产，且生产不受季节、气候、地域限制，所以常常被用作基因工程的受体细胞。
9．如图为绿色荧光小鼠制备流程图，Gfp是绿色荧光蛋白基因，请分析回答：
(1)构建表达载体需要的酶是：__________________________________，表达载体包含绿色荧光蛋白基因Gfp、_______、_____________、终止子和复制原点等。
(2)图中载体上的Neo基因是一种抗生素抗性基因，图中步骤③所用的G418是一种抗生素(对细胞有毒害作用)，添加G418的目的是______________________。
(3)图中所用的胚胎干细胞来自___________________________。
(4)图中步骤⑤要将细胞注射入图中囊胚的________位置，图中步骤⑥胚胎移植前要对代孕母鼠用激素处理，目的是________。
(5)可以使用________方法在蛋白质水平上鉴定小鼠是否存在绿色荧光蛋白。
【答案】 （1） 限制性核酸内切酶、DNA连接酶 标记基因 启动子 （2）筛选出导入目的基因的胚胎干细胞 （3）早期胚胎或原始性腺 （4） 内细胞团 同期发情处理 （5）抗原—抗体杂交
（4）步骤⑤导入受体细胞使要将细胞注射入图中囊胚的内细胞团，因为它具有发育的全能性。图中步骤⑥胚胎移植前要对代孕母鼠用激素处理，目的是进行同期发情处理，使生理状况相同。
（5）在蛋白质水平上检测目的基因是否表达利用抗原-抗体杂交技术，如果出现杂交带说明表达成功。
点睛：基因工程中目的基因的检测在分子水平上有三方面，即DNA层次，mRNA层次和蛋白质层次，前两个层次可以用分子杂交，蛋白质层次利用的是抗原-抗体杂交，还有可以在个体方面进行检测，对个体进行相应的处理，看是否有相应的性状。
10．下图为吉林大学农学部奶牛繁育基地成功培育出的一头携带转入赖氨酸基因的克隆牛“织女”的大致过程，请据图回答问题：
（1）图中获得赖氨酸基因所需要用到的工具是_____________，若我们已知赖氨酸基因的碱基序列，一般采用________________法获取该目的基因。
（2）克隆牛“织女”的诞生过程中涉及到的细胞水平的现代生物技术主要有:____________(至少写出两点）。
（3）从④到⑤的过程可获得较多的遗传同质早期胚胎，常采用的方法是进行_____________。
（4）对移植前的胚胎进行性别鉴定时，一般采用SRY—PCR方法，选择出现阴性反应的
______(性别)胚胎进行移植。
（5）为提高经济效益，某养猪场引进了一头肉质优良的花猪，运用___________(填“DNA重组”、“核移植”或”胚胎分割”)技术可实现利用当地品种生产花猪的设想。
（6）在现有技术条件下，还不能将从动物体内分离出来的成熟的体细胞直接培养成一个新个体，而是必须将体细胞的细胞核移植到去核的未受精的卵细胞中才能发育成新个体，你认为最可能的原因是________。
A.卵细胞大，便于操作
B.卵细胞含有的营养物质多
C.卵细胞的细胞质可使体细胞核全能性得到表达
D.重组细胞才具有全能性
【答案】 （1） 限制性核酸内切酶 人工化学合成 （2）核移植技术、动物细胞培养、胚胎移植（3） 胚胎分割 （4）雌性 （5） 核移植 （6） C
11．回答下列关于微生物的问题：
检验饮用水的细菌、病毒的含量是有效监控部分疾病发生的必要措施。请回答下列与检验饮用水中大肠杆菌有关的问题:
⑴检验大肠杆菌的含量时，通常将水样进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的水样用涂布器分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养，记录菌落数量，这种方法称为_____________。如图所示的四种菌落分布图中，图_________不是由该方法得到的。
⑵现有一升水样，用无菌吸管吸取1mL转至盛有9mL无菌水的试管中，依次稀释至103稀释度。各取0.1mL已稀释103倍的水样分别接种到三个培养基上培养，记录的菌落数分别为55、56、57，则每升原水样中大肠杆菌数为_________。
⑶有三种材料或用具需要清毒或灭菌:①培养细菌用的培养基与培养皿；②玻棒、试管、烧瓶和吸管；③实验操作者的双手。其中需要消毒的是_______（填序号）,需要灭菌的是_____________（填序号）。
下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方。
⑷根据用途划分该培养基属于______培养基（“选择”或“鉴别”）。该培养基中的碳源是______________________。
⑸以下微生物发酵生产特定产物时，所利用主要微生物的细胞结构与大肠杆菌相同的是_______________（多选）。
A.制作果酒B.由果酒制作果醋C.制作泡菜D.制作腐乳
【答案】 （1） （稀释）涂布平板法 D（2） 5.6×108 （3）③ ①② （4）鉴别 乳糖、蔗糖（蛋白胨、牛肉膏）（5） BC
(4)该培养基的配方中含有显色剂，据此可判断：该培养基从用途上划分，属于鉴别培养基。该培养基中的碳源是乳糖、蔗糖（蛋白胨、牛肉膏）。
(5) 大肠杆菌是由原核细胞构成的原核生物。制作果酒时利用的酵母菌和制作腐乳时利用的毛霉，均是由真核细胞构成的真核生物，A、D错误；由果酒制作果醋时利用的醋酸菌和制作泡菜时利用的乳酸菌，都是由原核细胞构成的原核生物，B、C正确。
12．下图是某生态农场以沼气为纽带，联动农作物种植、蚯蚓养殖、养鱼、养鸡、养鸭等产业的示意图。请据图回答下列问题：
（1）图中蘑菇房中的蘑菇等真菌属于生态系统成分中的_________________。
（2）该生态农场实现了生活垃圾、动物粪便、沼渣和沼液的充分利用，利用了生态学的_____________原理。养鱼场的池塘不用换水，池底干干净净，每天只需补充蒸发水，所有生物正常生存，说明该池塘具有_____________能力。
（3）利用沼气燃烧为鸡舍延长照明时间，提高产蛋率；利用性外激素诱捕果园中的害虫。这些实例体现了生态系统的___在农业生产中的应用。该农场果园的抵抗力稳定性较低，最可能的原因是_________。
（4）该生态农业与传统农业相比，具有明显的优势是______________、_____________。
【答案】 分解者 物质循环再生 自我调节 信息传递 果园中生物多样性低，营养结构简单 能量多级利用 减轻了对环境的污染(实现了废物资源化等)
（3）信息传递在农业生产中的应用：①提高农产品和畜产品的产量，如利用沼气燃烧为鸡舍延长照明时间，提高产蛋率；②对有害动物进行控制，如利用性外激素诱捕果园中的害虫，果园中生物种类少，营养结构简单，因此其抵抗力稳定性低。
（4）此生态农业与传统农业相比，明显的优势是能量多级利用和减轻了对环境的污染（或实现了废弃物资源化等）。
13．下图为苹果醋的工业生产流程，以及实验室分离、纯化发酵菌的方法步骤。请回答以下问题：
纯化发酵菌的方法步骤:配制培养基→培养基灭菌→接种→培养→挑选符合要求的菌落。
（1）在微生物的实验室培养中，获得纯净培养物的关键是___________，因此需对培养基和培养皿进行灭菌，空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使破坏DNA的结构，也能使蛋白质___________。
（2）上图中①过程与②过程需要接种的发酵菌分别是_____________________。
（3）某同学计划统计食醋中该发酵菌的总数，他选用10-4、10-5、10-6稀释液进行涂布，每种稀释液都设罝了3个培养皿。从对照实验的角度看，还应设置的一组对照组是___________________，设置对照组的目的是______________________。
（4）对同一浓度的发酵菌稀释液，分别用血球计数板计数和稀释涂布平板法计数，若不存在实验误操作， 则前者的数量___________（填“多于”、“等于”或“小于”）后者，其原因是____________________。
【答案】 （1） 防止外来杂菌的入侵 变性（空间结构破坏） （2）酵母菌和醋酸菌 （3）不接种的空白培养基 证明培养基制备过程中是否被杂菌污染 （4）多于 有些菌落连接在一起，计数偏小
（3）实验设计过程应遵循对照原则，该实验还应增设一组不接种的空白培养基作为对照，以证明培养基制备过程中是否被杂菌污染。
（4）血球计数板计数法，统计的是直接看到的细菌，无论死活都会被记录上。相比之下平板计数法只能统计活的且能在所使用的平板上生长繁殖的细菌。此外平板计数法统计的是菌落
数而不是细菌的个数，有些菌落连接在一起，那么只能形成一个菌落，计数偏小。
14．[生物——选修3：现代生物科技专题]
某种荧光蛋白（GFP）在紫外光或蓝光激发下会发出绿色荧光，这一特性可用于检测细胞中目的基因的表达。某科研团队将某种病毒的外壳蛋白（L1）基因连接在GFP基因的5′末端，获得了L1-GFP融合基因（简称为甲），并将其插入质粒P0，构建了真核表达载体P1，其部分结构和酶切位点的示意图如下，图中E1~E4四种限制酶产生的黏性末端各不相同。
回答下列问题：
（1）据图推断，该团队在将甲插入质粒P0时，使用了两种限制酶，这两种酶是______。使用这两种酶进行酶切是为了保证 ______，也是为了保证______。
（2）将P1转入体外培养的牛皮肤细胞后，若在该细胞中观察到了绿色荧光，则说明L1基因在牛的皮肤细胞中完成了_____和______过程。
（3）为了获得含有甲的牛，该团队需要做的工作包括：将能够产生绿色荧光细胞的_____移入牛的______中、体外培养、胚胎移植等。
（4）为了检测甲是否存在于克隆牛的不同组织细胞中，某同学用PCR方法进行鉴定。在鉴定时应分别以该牛不同组织细胞中的______（填“mRNA”“总RNA”或“核DNA”）作为PCR模板。
【答案】 （1）E1和E4 甲的完整 甲与载体正确连接 （2）转录 翻译 （3）细胞核 去核卵母细胞 (4)核DNA
（3）若要获得含有甲的牛，可采用核移植技术，即将能够产生绿色荧光细胞的细胞核移入牛的去核卵母细胞中获得重组细胞，并将该重组细胞在体外培养成重组胚胎，再经过胚胎移植
等获得含有甲的牛。
（4）PCR是多聚酶链式反应的缩写，是一种在生物体外复制特定DNA片断的核酸合成技术。若利用PCR方法检测甲是否存在于克隆牛的不同组织细胞中，则应分别以该牛不同组织细胞中的核DNA作为PCR模板。
15．血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分,负责血液中O2或CO2的运输。请根据血红蛋白的提取和分离流程图回答问题。
（1）将实验流程补充完整:A为_____,B为____。凝胶色谱法是根据_______来分离蛋白质的有效方法。
（2）洗涤红细胞的目的是去除____,洗涤次数过少,无法除去____;离心速度过高和时间过长会使____一同沉淀,达不到分离的效果。洗涤干净的标志是____。释放血红蛋白的过程中起作用的是____。
（3）在洗脱过程中加入物质的量浓度为20 mmol/L的磷酸缓冲液（pH为7.0）的目的是_______。如果红色区带____,说明色谱柱制作成功。
【答案】 (1)血红蛋白的释放 样品的加入和洗脱 相对分子质量的大小 (2)杂蛋白（血浆蛋白） 血浆蛋白 白细胞 离心后的上清液中没有黄色 蒸馏水和甲苯 (3)准确模拟生物体内的生理环境,保持体外的pH和体内一致 均匀一致地移动
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