高三一轮复习生物考点限时检测：微生物的培养和利用

考点限时检测 1．不同的微生物对营养物质的需要各不相同。下列有关一种以 CO2 为唯一 碳源的自养微生物的描述，不正确的是( ) A．氮源物质可为该微生物提供必要的氮素 B．碳源物质也是该微生物的能源物质 C．无机盐是该微生物不可缺少的营养物质 D．水是该微生物的营养要素之一 2．下列关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述，错误的是( ) A．操作顺序为计算→称量→溶化→倒平板→灭菌 B．将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯 C．待培养基冷却至 50 ℃左右时倒平板 D．待平板冷却凝固后将平板倒过来放置 3．[2021·衡水中学全国高三联考]秸秆还田可增加土壤肥力，缓解环境污 染。为分离分解纤维素的微生物菌种，实现废物的资源化利用，研究人员设计了 “土壤取样→选择培养→梯度稀释→涂布平板→挑选菌株”的实验流程。下列叙 述错误的是( ) A．配制培养基时，应在高压蒸汽灭菌之后调节 pH B．选择培养时，应使用纤维素为唯一碳源培养基 C．进行梯度稀释时，应在酒精灯火焰旁完成各种操作 D．挑选菌株后，应将使用过的培养基进行灭菌后再丢弃 4．能够测定样品活菌数的方法是( ) A．稀释涂布平板法 B．直接计数法 C．质量法 D．比浊法 5．通过选择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需的微生物。在缺 乏氮源的培养基上，大部分微生物无法生长；在培养基中加入青霉素可以抑制细 菌和放线菌的生长；在培养基中加入 10%的酚可以抑制细菌和霉菌的生长。利用 上述方法能从混杂的微生物群体中分别分离出( ) ①大肠杆菌 ②霉菌 ③放线菌 ④固氮细菌 A．④②③ B．①②③ C．①③④ D．只有③④ 6．[2021·重庆市高三调研]我国生活饮用水卫生标准规定：接种 1 mL 水样 在牛肉膏蛋白胨琼脂培养基上，经 37 ℃、24 h 培养后，所生长出的菌落总数不 得大于 100。某兴趣小组对某蓄水池进行细菌总数测定，以了解池水是否符合饮 用水卫生标准。回答下列问题： (1)用三角瓶取水样前，可采用________________(填灭菌方法)对三角瓶灭 菌；取水池的水龙头用酒精擦拭后，再通过________的方法灭菌；在微生物培养 过程中，除考虑营养条件外，还要考虑________和渗透压等条件。 (2)该小组通过滤膜法测定细菌总数，将 10 mL 的水样进行过滤后，将滤膜 放在牛肉膏蛋白胨琼脂培养基上培养，培养时应将平板倒置，其目的是 ________________________，经过 24 h 培养，得到的结果为：平板 1 中 41 个菌 落、平板 2 中 35 个菌落、平板 3 中 38 个菌落，则所取水样测定结果________(填 “符合”或“不符合”)饮用水的标准。 (3)若要鉴别水样中的大肠杆菌，培养基中还应加入的非营养物是 ____________，若要长时间保存大肠杆菌，可以采用____________；使用过的培 养基及其培养物必须经过处理后才能丢弃，以防止______________________ __________。 7．[2021·内江六中入学考试]2019 年起，全国地级及以上城市全面启动生 活垃圾分类工作，习近平总书记强调，实行垃圾分类，关系广大人民群众生活环 境，关系节约使用资源，也是社会文明水平的一个重要体现。有机垃圾通过微生 物处理的基本原理是利用微生物降解菌产生的多种酶，对分类后的有机垃圾进行 快速分解，其技术流程如下： (1)样品采集：样品取自某食堂的餐厨垃圾，原因是_____________________ _____________________________________________________________________ _________。 (2)分离纯化：上述流程中利用________________(方法)进行菌株的分离纯 化，接种后进行培养时，需将培养皿呈________状态放置。 (3)鉴别培养：对餐厨垃圾组分进行分析发现，其中纤维素类含量较高。若 对菌株的纤维素降解活性进行鉴别，需将分离纯化得到的各菌种，接种于加入 ____________的培养基中，通过比较菌落的______________来判断降解活性的高 低。 (4)现将各类有机物降解活性较高的 3 个菌株分别制成菌剂，测定其对餐厨 垃圾的实际降解能力，其实验思路如下： ①配制培养基：将纤维素、淀粉、脂肪、蛋白质和水，按照餐厨垃圾的组分 比例配制。 ②将等量的 3 种菌剂，分别与等量的培养基在适宜的环境中进行混合培养。 ③培养相同时间，测定____________________。 (5)筛选出高效降解纤维素的菌株后，若需要长期保存，可采用____________ 的方法。纤维素分解菌分解纤维素主要依赖产生的纤维素酶，该复合酶至少包括 三种组分，即______________________。为测定纤维素酶降解纤维素的能力，需 要先将该酶分离出来，常用________法分离，该方法是根据________________ ____来分离蛋白质的。 8．[2021·重庆高三诊断]北方每年在小麦丰收的季节，焚烧秸秆时火焰四 起，烟雾弥漫，不但导致严重的雾霾而且造成资源的浪费。科学家为了解决这个 问题，努力寻找能分解秸秆中纤维素的微生物，他们做了如下实验，据图回答： (1)根据甲图，选择培养纤维素分解菌要用____________培养基。为了鉴别 纤维素分解菌，常在培养基中加入________。为了统计样品中活菌的数目常用方 法除稀释涂布平板法外，还有__________的方法。 (2)乙图是培养出的单菌落示意图，最适合分解秸秆的两个菌落是 ________(填数字)，纤维素分解菌将纤维素最终分解为________________。从图 中可以看出培养基上菌落数较少，推测可能的原因是________________________ _____________________________________________________________________ ___________________________________。 (3)为了长期保存该微生物，可以采用_____________________________ __________的方法。 9．日前微博传言手机细菌比马桶按钮多，央视和北京卫视通过实验展示调 查结果如下图。回答下列相关问题： (1)该实验需制备培养基，培养基一般都含有水、碳源、________________。 (2)据图可知，两电视台均采用________法接种，该方法需要________(多选)。 A．接种环 B．酒精灯 C．移液管 D．涂布器 E．无菌水 (3)通过观察菌落的________，可知手机屏幕和马桶按钮都存在多种微生物。 两电视台实验操作均正确且完全一致，但报道结果截然不同，你认为其原因是： _____________________________________________________________________ _____________________________________________________________________ ______。 (4)按图操作取样面积，实验员测定某手机屏幕的细菌数量，将 10 mL 菌悬 液进行梯度稀释，分别取 0.1 mL 稀释倍数为 102 的样品液接种到三个培养基上， 培养一段时间后，统计菌落数分别为 48、50、52，则该手机屏幕的细菌数为 ________个/cm2。该实验的对照组该如何设置______________________________ _____________________________________________________________________ _____________________________________________。 10．[2021·广东省梅州市丰顺高三质检]苯酚是含酚工业废水的主要成分， 具有致癌、致畸和致突变作用。苯酚降解菌能分解工业废水中的苯酚。回答下列 问题。 (1)MP 培养基的成分为 KH2PO4 2.25 g/L、K2HPO4 2.75 g/L、(NH4)2SO4 1.0 g/L、 MgCl2 0.2 g/L、NaCl 0.1 g/L、FeCl3 0.02 g/L、CaCl2 0.01 g/L。在制作苯酚 降解菌的富集培养基和平板分离培养基时，应在 MP 培养基的基础上，前者添加 ________成分，后者添加____________成分，然后对培养基进行灭菌，灭菌的方 法为______________。 (2)将等量的污泥样液均分两份，分别接种在相同体积的 MP 培养基和富集培 养基中，摇床振荡培养，振荡培养的目的是________________________________ ____________。两种培养中，苯酚降解菌菌体密度较低的培养基是____________， 原因是______________________________。将富集培养基中的菌液稀释并涂布在 平板上，经过一段时间的培养，在平板上长出一些形态、大小和颜色不完全相同 的菌落，这说明______________________。 答案 1． B 2． A 3． A 4． A 5． A 6． (1)高压蒸汽灭菌法或干热灭菌法 灼烧 温度、 pH (2)防止凝水滴落污染培养基 符合 (3)伊红美蓝 甘油管藏法 培养物的扩散，对环境造成污染 7． (1)厨余垃圾中富含各类有机物，相应的分解菌含量丰富 (2)稀释涂布平板法 倒置 (3)刚果红 透明圈直径(或者透明圈直径与菌落直径比值) (4)各组培养基的减少量(或各组培养基的剩余量) (5)甘油管藏 C1 酶、CX 酶和葡萄糖苷酶 凝胶色谱(分配色谱) 相对分子 质量的大小 8． (1)选择 刚果红(CR) 显微镜直接计数 (2)1 和 4 葡萄糖 土壤中纤维素分解菌较少，稀释的倍数太大 (3)甘油管藏 9． (1)氮源和无机盐 (2)稀释涂布平板 BCDE (3)形态、大小 手机的取样和马桶按钮的取样都不相同 (4)2×104 取培养基涂布 0.1 mL 无菌水进行培养，其它条件与实验组相同 且适宜 10． (1)苯酚 苯酚和琼脂 高压蒸汽灭菌 (2)使菌体与培养液、空气充分接触，利于菌体获得更多营养 MP 培养基 MP 培养基中缺少苯酚降解菌生长所需的碳源 能降解苯酚的菌有多种