第10章 细菌和病毒的遗传
遗传学的发展与研究材料密切相关:
• 性状遗传 植物(豌豆)
• 细胞遗传 果蝇
• 分子遗传 细菌和病毒
• 遗传学从细胞水平发展到分子水平的另一
个重要原因是对基因的化学和物理结构的
深入了解。
第1节 细菌和病毒
真核生物(eukaryote)
原核生物(prokaryote)
原核细胞:
• 没有核膜和明确的核结构,没有细胞器,
不进行有丝分裂和减数分裂,只通过简单
的裂殖方式增殖。
• 遗传物质简单
一、细菌(Bacteria)
• 细菌是单细胞原核生物
• 是地球上生物量最大的一类生物,占据了
地球上大部分的生物干重。
大肠杆菌 E.coli
E.Coli 的拟核
细菌的繁殖非常快
• 在适宜的条件下,每20分钟繁殖一代
• 一个细胞繁殖n代,就有2n-1+1个细胞。
• 一昼夜24小时,72代,271+1=2.36×1021
细菌遗传研究的方法:
• 基本培养基(minimal medium)
• 完全培养基(complete medium)
细菌的表现型:
• 菌落形态
颜色、大小、边缘状态等
• 营养需求
野生型(prototroph)
营养缺陷型(auxotroph)
• 对药物、噬菌体和其他因素的反应
青霉素(penicillin):pens penr
细菌的平板培养
细菌的稀释培养及菌落
影印培养法
二、病毒 virus
• 病毒按寄主可分为:
动物病毒,植物病毒,细菌病毒。
• 病毒按遗传物质可分:
RNA病毒,DNA病毒。
噬菌体 bacteriophage,phage
• 细菌病毒
• 是研究得比较清楚的病毒。
• 噬菌体侵染细菌后在均匀生长的细菌培养
板上形成噬菌斑(plaque)。
• 根据噬菌斑的形态和生长特点可以鉴别不
同的噬菌体。
噬菌体的分类
按其在宿主细胞中的生活方式分为:
温和噬菌体
烈性噬菌体
T4噬菌体形态
T4 phage的结构模式
烈性噬菌体
virulent phage
温和噬菌体(temperate phage)
u 具有溶原性(lisogeny)的生活周期。
u 侵入细菌以后,细菌细胞并不马上裂解。
λ噬菌体(λ phage)
• 侵入细菌后,细菌并不裂解
• λ噬菌体的DNA通过交换整合到细菌染色
体上。
• 随着细菌DNA一起复制。
溶原性细菌(lysogenic bacterium)。
u 被溶原性噬菌体感染了的细菌。
u 整合在寄主染色体中的噬菌体DNA称为原
噬菌体(prophage)。
溶源周期→裂解周期:
u 原噬菌体通过诱导(induction)可转变
为烈性噬菌体,进入裂解周期。
u 诱导方式:UV、温度改变、与非溶原性细
菌接合等。
u 诱导使阻遏物失活,噬菌体的基因表达,
进入裂解周期。
P1 噬菌体 P1 phage
u 感染E.coli以后,不整合到细菌DNA上,
而是独立存在于寄主细胞内。
u 不影响宿主细胞的正常代谢
u P1 DNA 自主复制,并分配到宿主的子细胞
中去,而且可以多于一个拷贝。
u受P1 噬菌体感染的细菌也可以因诱导而进
入裂解周期。
三、细菌和病毒在遗传研究中的优越性
• ①世代周期短
• ②易于管理和进行生物化学分析
• ③遗传物质比较简单
• ④是单倍体,便于研究基因的突变
• ⑤便于遗传操作
• ⑥可用作研究高等生物的简单模型。
四、细菌和病毒的拟有性过程
u 真核生物有性生殖的本质:遗传物质的交流与重组。
u 细菌和病毒不能进行有性生殖。
u 细菌和病毒的遗传物质也可以传递。
u 这种遗传物质的传递,被称之为拟有性过程。
u 拟有性过程指的是细菌或病毒获取外源遗传物质的
方式。
拟有性过程:
u 当不同的病毒颗粒同时感染一个细菌时,他们在
细菌体内可以交换遗传物质,形成重组体。
u 细菌获取外源遗传物质有4种方式:
转化(transformation)
接合(conjugation)
性导(sexduction)
转导(transduction)
第2节 噬菌体的遗传分析
混合感染(mixed infection):
l 两个基因型不同的噬菌体同时感染一个宿
主细胞,又称为双重感染(double
infection)。
l 共同生存在同一个宿主细胞中的两个噬菌
体DNA也可以发生交换,产生基因重组。
T2 phage的重组作图
u 一个正常的T2 phage产生的噬菌斑小而边缘
模糊,记为r+;
u 突变体r-产生的噬菌斑大而边缘清晰。
u r- T2 噬菌体是速溶(rapid lysis)突变体。
T2 phage的重组作图
u 正常的T2 噬菌体能感染E.coli B株,h+。
u 突变型E.coli B株能抗T2的感染,记为B/2
株。
u h+的突变型h-又能克服B/2株的抗性,既能
侵染B株又能侵染B/2株。
T2 phage 和 E.coli的关系
B B/2
h+ 能感染 不能感染
h- 能感染 能感染
T2 基因重组试验:
u h- 和 h+ 噬菌体均能感染E.coli B株。
u 用基因型为r+h- 和 r-h+的两种T2 噬菌体
同时感染E.coli B株(双重感染)。
u 将双重感染后释放出来的子代噬菌体接种
在同时长有B株和B/2株的培养板上,记录
噬菌斑的数目和形态。
T2 plaques
• h+r- 42 半透明,大
• h-r+ 34 透明,小
• h-r- 12 透明,大
• h+r+ 12 半透明,小
亲本型
重组型
u 重组率(Rf)=24%=24cM
T2 phage重组试验结果
根据上表结果可以分别作出3个连锁图
有四种可能的排列顺序
思考题:
你能否确定这4个基因座的关系?还缺什么条
件?怎么解决?
λ噬菌体的基因重组与作图
u Kaiser(1955),λ噬菌体的重组作图。
u 用UV照射获得了5个λphage的突变型:
s型,噬菌斑较小,
mi型,噬菌斑特别小,
c型,噬菌斑完全清晰,
co1型,噬菌斑中间模糊,四周清晰,
co2型,噬菌斑的中部较co1型更为浓密。
λ噬菌体s co1 mi × + + +的杂交结果及分析作图
λ噬菌体s co1 mi 基因连锁图
第3节 细菌的遗传分析
细菌与细菌之间的遗传物质的交流(拟有性
过程)有四种不同的方式:
u 转化(transformation)
u 结合(cojugation)
u 性导(sexduction)
u 转导(transduction)
一、转化(transformation)
• 细菌通过细胞膜摄取周围环境中DNA片段,
并通过重组将其整合到自身Chr中的过程。
转
化
示
意
图
转化示意图
trp2+his2+tyr1+ (供体)×trp2-his2-tyr1-(受体)
的转化类型及重组率计算
根据上表计算结果绘制的连锁图
二、接合 conjugation
• 在原核生物中,两个细胞在相互接触过程
中,遗传物质从一个个体转移到另一个个
体的现象称为结合。
细
菌
的
接
合
试
验
细菌接合的电镜照片
F因子
u A菌株之所以能成为供体,是因为它含有
一个性因子(sex factor),又称致育因
子(fertility factor),简称F因子。
u 附加体:
质
粒
相关概念:
u F
u F+
u F-
u Hfr:High frequency recombination
u F′
F′因子的形成
接
合
过
程
示
意
图
接合过程示意图
Hfr
菌
株
的
形
成
及
其
基
因
转
移
Hfr菌株的形成及其基因转移
部分二倍体:
u 当Hfr菌的部分染色体进入F-细胞后,F-
细胞中就成为部分二倍体(partial
diploid)或部分合子(merozygote)。
u 新转入的DNA片断称为供体外基因子
(exogenote),而受体的染色体称为受体
内基因子(endogenote)。
部分二倍体及其交换
中断杂交试验
u Hfr中的DNA向F-转移时,是从酶切端点开
始直线式进行的。
u 因此可以用于基因作图。
中断杂交试验:
Hfr:strs thr+ leu+ azis tonAs galb+ lac+
F-:strr thr- leu- azir tonAr galb- lac-
strr 对链霉素有抗性
azir 对叠氮化合物有抗性
tonAr 对T1噬菌体有抗性
thr+ leu+ galb+ lac+ 对苏氨酸、亮氨酸、半
乳糖和乳糖为原养型
中断杂交后,接合后体中各个性状出现的频率
大肠杆菌Hfr strs thr+ leu+ azis tonAs galb+ lac+
× F- strr thr- leu- azir tonAr galb- lac-的结果
根据中断杂交试验绘制的连锁图
用中断杂交试验确定的几个Hfr菌株的基因顺序
F因子插入的位置及方向
重组作图
a 重组体的基因型是lac+ade+
b 重组体的基因型是lac-ade+
大
肠
杆
菌
染
色
体
图
三、性导
u性导(sexduction):
以F′因子为媒介,将供体细胞的部分遗传
物质导入受体细胞形成部分二倍体。
u并发性导(co-sexduction):
两个相邻的基因,同处于一个F′因子上被
转移,称为并发性导。
性
导
过
程
示
意
图
四、转导 transduction
u 以噬菌体为媒介,将细菌的小片段染色体
或基因从一个细菌细胞转移到另一个细菌
细胞的过程。
转导颗粒 transducing particle
u 将宿主DNA片断包装在蛋白质外壳内的假
噬菌体。
普遍性转导
普
遍
性
转
导
普遍性转导
共转导(cotransduction)
u 两个基因被包装在一个转导颗粒中转导。
以E.coli的P1噬菌体进行下列转导:
• 供体thr+leu+ azir
• 受体thr-leu-azis
• 先用P1 噬菌体感染供体菌株,再用来自供
体的新一代P1噬菌体感染受体菌株。
• 然后检测受体菌基因型。
检测结果:
选择标记 非选择标记
1 leu+ 50% azir ,2% thr+
2 thr+ 3% leu+ , 0% azir
3 thr+leu+ 0% azir
转导颗粒与染色体之间通过四次交换
形成转导体,这种转导体的频率最低
作业:
7、8、10